实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是:

实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是:...

2021年医师系列《公卫执业医师》考试题库-公卫执业医师-十三、重组DNA技术-

医药卫生-执业医师

单选题-实验室内常用的连接外源性DNA载体DNA的酶是:

单选题

A.Taq酶

B.T4DNA连接酶

C.DNA聚合酶I

D.DNA聚合酶Ⅱ

E.DNA聚合酶Ⅲ

我个人认为这个应该是:B

解析:外源DNA片段和线状质粒载体的连接,也就是在双链DNA5'磷酸和相邻的3'羟基之间形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸,可生成4个新的磷酸二酯链。但如果质粒DNA已去磷酸化,则吸能形成2个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有2个单链切口,当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的5'磷酸和3'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的DNA连接酶催化,这两种酶就是大肠杆菌DNA连接酶和T4噬菌体DNA连接酶。实际上在有克隆用途中,T4噬菌体DNA连接酶都是首选的用酶。这是因为在下述反应条件下,它就能有效地将平端DNA片段连接起来。 

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